凝膠過濾柱是一種基于分子大小差異進(jìn)行分離的層析技術(shù)核心工具，也被稱為分子篩層析柱或尺寸排阻層析柱(Size Exclusion Chromatography, SEC)。
 

　　凝膠過濾柱操作注意事項(xiàng)：

 

　　層析柱的選擇：
 

　　理想的層析柱的直徑與長度之比是1:25~100。當(dāng)用同樣直徑的層析柱分離兩種以上的物質(zhì)時(shí)，長層析柱比短的分辨率高；當(dāng)用同樣長度的層析柱分離兩種以上的物質(zhì)時(shí)，層析柱直徑大的比小的分辨率高。
 

　　裝柱效果：
 

　　裝柱效果對凝膠過濾層析影響很大，應(yīng)該嚴(yán)格按照說明要求，使用裝柱裝置裝柱。確保柱床表面平整，無溝流及氣泡，否則應(yīng)重裝。
 

　　洗脫條件：
 

　　洗脫過程中應(yīng)嚴(yán)格控制流速，切勿過快。上樣的體積要小，濃度不宜過高。加樣及整個(gè)洗脫過程中，嚴(yán)防柱面變干。
 

　　緩沖液的選擇：
 

　　純化過程必須嚴(yán)格控制緩沖液的pH及離子強(qiáng)度。避免使用對凝膠或樣品有損害的緩沖液。
 

　　柱子的保養(yǎng)與保存：
 

　　凝膠過濾柱需要注意防止微生物的生長。被微生物污染后的色譜柱將無法重現(xiàn)原來的分離效果與柱效，嚴(yán)重時(shí)會(huì)使凝膠色譜柱報(bào)廢。
 

　　常用的保存抑菌劑有0.02%疊氮鈉、0.002%洗必泰(hibitane，雙氯苯雙胍己烷)、0.01%~0.02%三氯丁醇、0.1mol/l氫氧化鈉等。
 

　　值得注意的是溫度不能過低，以免凍結(jié)。為了不凍結(jié)可以提高保存時(shí)介質(zhì)的離子強(qiáng)度。